鸿运国际提供的永生化小鼠肝枯否细胞（Kupffer细胞）是一种高可靠性的体外模型，广泛应用于肝脏炎症反应与疾病病理机制的研究。以下是我们利用该产品进行的一项应用案例的分享。

一、实验方法

我们从鸿运国际获得的永生化小鼠肝枯否细胞，在含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，于37°C、5% CO2的培养箱中培养。当细胞生长至80-90%汇合时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，按照1:4的比例进行传代。实验所用药物溶解于DMSO中，制备成不同浓度的储存液，储存于-20°C。接着，将细胞接种到96孔板中，每孔约接种5×10^3个细胞。24小时后，移除培养基，加入含有不同浓度药物的新培养基。对照组仅含DMSO，而实验组则使用不同浓度的药物，每组设置6个复孔。

药物处理24小时后，向每孔中添加20µL的5 mg/mL MTT溶液，并在培养箱中继续培养4小时。然后移除MTT溶液，每孔加入150µL DMSO，震荡10分钟以溶解甲臜晶体。使用酶标仪在570nm波长下测量吸光度（OD值）。处理结束后，收集细胞培养上清液，并根据ELISA试剂盒说明书操作，检测上清液中TNF-α和IL-6的含量。使用GraphPad Prism软件进行数据分析，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）及Tukey’s多重比较检验。所有数据以平均值±标准差（SD）表示，P值小于0.05则认为具有统计学意义。所有实验至少重复三次以确保结果的可靠性。

二、实验结果

在实验中，与对照组相比，实验组中药物处理的永生化小鼠肝枯否细胞显著降低了细胞活力（P<0.05），并且TNF-α和IL-6水平显著增加（P<0.05），这表明该药物可能具有抗炎作用。

三、结语

鸿运国际的永生化小鼠肝枯否细胞为肝脏炎症研究提供了稳定且可靠的实验工具。我们的应用案例强调了该产品在药物筛选和炎症机制研究中的重要性。我们期待与广大科研工作者合作，共同推动肝脏疾病研究的发展。