随着冬季的到来，呼吸道疾病如季节性流感和肺炎的发病率显著上升，各地医院面临就诊高峰。在这种情况下，为患者提供及时有效的治疗以及快速准确的诊断方法显得尤为重要。在众多检测方法中，一步RT-qPCR法（一管式RNA全预混试剂）凭借其高效、便捷和灵敏的特点，得到了广泛的认可。

在一步法反应中，基因特异性引物首先与待检测靶标相匹配，并在逆转录酶的催化下合成第一链cDNA。然而，实际应用中常常会出现错误的模板-引物匹配，导致非特异cDNA的生成。这类非特异性cDNA可能导致体系内出现非特异性扩增，消耗反应所需的组分，从而限制后续主反应的进行。当靶核酸浓度较低时，扩增性能往往会因竞争作用而变差，造成扩增曲线形态不佳、荧光增量低、Ct值滞后等问题，从而降低检测的灵敏度和特异性。此外，一管式RNA全预混试剂在长期保存过程中，酶液活力易下降或失活，导致其性能受损。

逆转录酶作为关键成分，其性能直接影响一步法核酸检测试剂的准确性和灵敏度。提高逆转录酶的特异性和稳定性对一管式RNA全预混试剂的开发至关重要。为此，鸿运国际推出了一款温启动逆转录酶，这款产品在低温下封闭酶活而在工作温度下激活，能够有效避免低温下的引物-模板错误匹配，提高检测的特异性和灵敏度。该酶采用适配体的方法进行热启动修饰，通过适配体筛选平台，制备了庞大的寡核苷酸随机序列文库，并在传统SELEX适配体筛选技术的基础上进行了优化，利用高通量测序替代传统克隆测序，经过多轮筛选和富集，筛选出亲和力高的适配体，并与逆转录酶进行混合孵育，最终确定最佳的适配体组合和酶修饰工艺。

经过大量筛选和工艺优化，鸿运国际的温启动逆转录酶在42℃下可封闭99%的酶活，封闭效果优于市面上同类竞品，并具备更强的封闭稳定性，使得反应液可以长期高效地获得逆转录产物。这一特点成功解决了全预混试剂储存稳定性的问题。同时，该产品在工作温度（55℃）下可释放95%以上的酶活，从而保障了试剂的扩增灵敏度。经过适配体修饰后，鸿运国际的温启动逆转录酶在非工作温度（30℃/37℃/42℃）下的酶活性极低，显著优于竞品A，有助于控制非特异性扩增，而在工作温度下（55℃），其活性完全释放，对扩增性能未造成任何影响。

鸿运国际的温启动逆转录酶在低浓度模板情况下，能够保持良好的扩增特异性，且与高拷贝数模板的扩增平台期一致。该产品在多个体系中测试于同类竞品A相比，其性能在Ct值出峰时间和检出率等方面均表现优越。经过改造的鸿运国际温启动逆转录酶能够以更快的速率合成cDNA，在相同PCR程序下，2分钟逆转录可达到和15分钟逆转录相同的灵敏度。在长时间稳定性测试中，该酶在37℃加压7天后，性能未见明显变化，而竞品A则表现出严重的扩增性能下降，灵敏度滞后超过2个Ct。

特别是在RNA全预混稳定性应用中，鸿运国际的温启动逆转录酶为客户优化和解决了多种问题。与同类竞品相比，鸿运国际的温启动逆转录酶可在更高温度下更好地封闭酶活，防止关键成分的降解，提高全预混试剂的稳定性。在实验中，将鸿运国际的温启动逆转录酶与竞品A分别应用于RNA全预混试剂中（反应液、酶液、多重引物探针提前预混），经37℃加压10天处理后，测试结果显示，使用鸿运国际温启动逆转录酶制备的全预混试剂与新配制对照组无显著差异，而使用竞品A的全预混试剂在加压处理后，则扩增效率明显降低（Ct值靠后，荧光平台期下降）。

总的来看，鸿运国际的温启动逆转录酶凭借其卓越的性能和稳定性，为生物医疗领域提供了强有力的支持，成为研发和临床应用中的理想选择。