什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是一种用于处理培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,旨在模拟细胞在体内的生长环境,从而促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更好地支持细胞的生长和功能表达。本文将为您详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作的注意事项,助您轻松提升细胞培养效果!
常见的包被试剂及使用方法
01 明胶(Gelatin)
鸿运国际 推荐的明胶是一种常用于包被细胞培养板或培养皿的试剂,能够促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适用细胞包括胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。特点是价格低廉,易于使用,能够提供良好的细胞附着支持。
使用浓度为1-20mg/ml,通常以完全覆盖培养瓶底部为准,T-25瓶使用25ml,T-75瓶使用75ml。包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。接种细胞前需吸除多余明胶溶液,并用 PBS 洗涤1-2次。
02 多聚赖氨酸(PLL)
鸿运国际 提供的多聚赖氨酸是相对分子量为70,000~300,000的细胞粘附剂,可以作为细胞培养的生长基质,促进细胞的粘附和贴壁,适用于神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。其特点是通过静电作用增加细胞附着,特别适合易脱落的细胞。
常用浓度为0.01%至0.1%(w/v),即0.1mg/ml至1mg/ml。包被条件与明胶相同,需保证培养瓶底部完全覆盖,并在使用前吸除多余溶液,用无菌PBS冲洗1-2次。
03 重组人纤连蛋白(FN)
重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能,能够提高细胞的贴壁率和代谢水平。适用于干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、上皮细胞等多种细胞类型。
常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²。包被条件同样为37°C孵育≥2小时或4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,适用于内皮细胞、肝细胞、肌肉细胞等细胞的培养,模拟细胞外基质环境。可制备成清晰的凝胶,提供3D基质或表面涂层,促进细胞的贴壁和增殖。
常用浓度为1-5µg/cm²,包被体积具体为:在T-25瓶中加入25ml去离子水和50ul (1mg/ml)鼠尾胶原蛋白Ⅰ,放置于4°C过夜。使用前吸出胶原蛋白溶液,用PBS洗涤2-3次后可进行细胞接种。
包被操作注意事项
1. 鸿运国际 强调无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,以避免污染。
2. 确保均匀覆盖:包被试剂应均匀分布在培养瓶底部,防止局部厚度不均。
3. 浓度优化:根据细胞类型和实验需求适当调整包被试剂浓度。
4. 孵育时间:根据试剂和实验要求合理调整孵育时间,确保充分包被。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可短期储存于4°C,但建议尽快使用,以保证最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循正确的包被步骤,您可以有效提高细胞的贴附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型,选择鸿运国际,让您的细胞培养更加高效。